Burlington vt svorio netekimas
Turinys
Šio straipsnio leidėjo pataisa buvo paskelbta m.
Balandžio 13 d Burlington vt svorio netekimas straipsnis atnaujintas Anotacija Mes pranešame apie chimerinio peptido EP45, naujo 45 aminorūgščių monomero dvigubo agonisto peptido, kuriame yra aminorūgščių sekos motyvų, esančių kraujo gliukozės kiekį mažinančio agento eksendino-4 Ex-4 ir apetito slopinimo agento PYY, projektą ir tikslinį patvirtinimą.
Kolektyviai tokie rezultatai yra nepaprastai reikšmingi tuo, kad jie siūlo naują strategiją, kurioje kartu egzistuojantys 2 tipo diabeto ir nutukimo medžiagų apykaitos sutrikimai bus gydomi naudojant vieną peptidą, pvz.
Įvadas Pastaraisiais metais intensyvaus biomedicininio tyrimo dėmesio centre tapo daugiafunkcinių peptidinių vaistų, veiksmingų vienu metu gydant kelias ligas, koncepcija.
Remiantis daugiau nei natūraliai pasitaikančių Burlington vt svorio netekimas, turinčių svarbių biologinių funkcijų žmonėms, sekas, nauji dvigubi agonistų peptidai gali būti suprojektuoti taip, kad jie galėtų stimuluoti du skirtingus G baltymų sujungtus receptorius GPCR 1, 2, 3.
Šie du agonistiniai peptidai turi išplėstas biologines funkcijas dėl jų dviejų receptorių specifiškumo 4. Čia pateikiame EP45, chimerinio dvigubo agonisto peptido, kuris turi stebėtiną gebėjimą veikti kaip gliukagono tipo peptido-1 receptoriaus GLP-1R ir neuropeptido Y2 receptoriaus NPY2Rprojektą ir tikslinį patvirtinimą. Šie du EP45 aktyvinti GPCR yra labai svarbūs medžiagų apykaitos homeostazei žmonėms 5, 6, 7, 8, 9, 10, ir jie abu yra nustatyti narkotikų atradimo tyrimų, kurie yra svarbūs 2 tipo diabeto gydymui T2DMtikslai.
Chimeriniai peptidai turi aminorūgščių motyvus, esančius dviejuose skirtinguose peptiduose Ši chimerinė struktūra išskiria juos iš atskiros dvigubos arba tri-agonistinės molekulės klasės, kurioje konjugacijos strategijos, apimančios sintetinę jungiklio chemiją, naudojamos saugoti peptidų, tokių kaip gliukagonas, GLP-1, gastrinas, pilnas ilgis aminorūgščių sekas.
Vis labiau pripažįstama, kad tinkamai suprojektuoti chimeriniai Burlington vt svorio netekimas yra kliniškai reikšmingi, nes jie pasižymi farmakologiniais privalumais, palyginti su pilno ilgio konjuguotais peptidais Šie privalumai yra geresnis farmakokinetika ir biologinis prieinamumas in vivotaip pat gebėjimas tiksliai suderinti dvigubo agonisto stiprumą ir veiksmingumą selektyviai modifikuojant aminorūgščių liekanas, kurios yra svarbios GPCR aktyvacijai.
Reumatas Suglobov | poilsiavieteasveja.lt
Pasaulinis nutukimo, diabeto ir susijusių metabolinių komplikacijų paplitimas didina širdies kaip sudeginti keturkojo Burlington vt svorio netekimas kraujagyslių ligų ir insulto riziką, kuri kartu kelia didelę grėsmę visuomenės sveikatai 17, Naujos strategijos, skirtos kovai su šiais sutrikimais, yra naudingos GLP-1 ir PYY 3—36dviejų peptidų, kurie kartu su žarnyno L-ląstelėmis yra atpalaiduojantys maistines medžiagas, gliukozės kiekį kraujyje mažinančiomis ir apetitą slopinančiomis savybėmis.
GLP-1 ir jo struktūriškai susiję sintetiniai peptidai pvz. Šiuo metu tiriamas PYY 3—36skirtas naudoti nutukimui gydyti, o taip pat slopina apetitą 4, 9, 13, 24 Įdomu tai, kad kai kuriose skrandžio aplinkkeliuose yra perdėta GLP-1 ir PYY 3—36 sekrecija RYGB operacijos pacientai, ir šie pokyčiai koreliuoja su ilgalaikiu apetito slopinimu ir svorio netekimu, susijusiu su tokia chirurgija GLP-1 prisijungia prie GLP-1R, B klasės GPCR, kuris signalizuoja per GS baltymus, skatindamas cAMP gamybą 26, ir tai išreiškiama ne tik kasos beta ląstelėse, kuriose ji reguliuoja insulino sekreciją 27, 28, bet ir hipotalaminiu ir makšties Burlington vt svorio netekimas neuronai, kuriuose jis reguliuoja apetitą Tiesioginis šių tyrimų tikslas buvo patvirtinti mikroplokštelių skaitymo tyrimą, leidžiantį cAMP gyvų ląstelių aptikimą 96 šulinėliais Naudojant racionalų vaistų dizainą, mes sintezavome ir ištyrėme 45 aminorūgščių monomerinį chimerinį peptidą EP45, kuriame yra dalinės aminorūgščių sekos eksendino-4 ir PYY 3—36 atitinkamai savo N- ir C-galuose 1 pav.
Santrumpa: AA, aminorūgščių grandinės ilgis. Z-kamino vaizdų dešiniojo skydo pagrindinės projekcijos MP perdangos iliustruoja citozolinės H fluorescencijos, citoskeletinio F-aktino imunoreaktyvumo ir DAPI branduolio dažymo pasiskirstymą. Kalibravimo strypai: 10 μm x; 20 μm už 63x. Kalibravimo strypai: 20 Burlington vt svorio netekimas. Kadangi Epac1 reaguoja į epac-selektyvius cAMP analogus, bet ne PKA-selektyvius analogus 40, mes siekėme nustatyti, ar Epac1 sutrumpinimas ir mutacija per H gali tapti nepajėgus atskirti šių dviejų ciklinių nukleotidų klasių.
Priešingai, ESI, trimetilfenilsulfonas, kuris yra specifinis Epac2 aktyvacijos inhibitorius 42, buvo neveiksmingas 3b2 pav. HEKHC24 ląstelės sukuria naują vaistų atradimo platformą.
Nude naked nėščioms moterims
Visos plokštės rodo galutinę bandomųjų medžiagų pusiausvyros koncentraciją, čia ir visuose tolesniuose skaičiumi. H nustatė nuo dozės priklausomus GLP-1 4a1 — b3 ir eksendino-4 4b1 — b3 pav.
GLP-1 4c1 — c3 pav. Ir deginti riebalus aplink klubus 4d1 — d3 pav. GLP-1 ir eksendino-4 agonistų veikimo matomos Kd vertės buvo atitinkamai 33 ir 23 pM 4a3, b3 pav.
Eksendino 9—39 antagonistinio poveikio K d reikšmės prieš GLP-1 ir eksendiną-4 buvo atitinkamai 9 ir 62 nM 4c3 pav. GLP-1 ir eksendinas-4 buvo neveiksmingos ląstelėse, transfekuotose su neigiamu kontroliniu tuščiu vektoriumi EV Suppl. A 2 ir b 2 palyginimai yra tarp ląstelių, kurios nėra apdorotos nešiklio kontrolė arba apdorotos nurodytomis GLP-1R agonistų koncentracijomis. C2 ir d2 palyginimai yra tarp ląstelių, apdorotų GLP-1R agonistais, jei nėra arba yra nurodytos nurodytos Ex 9—39 koncentracijos.
Taip pat buvo įmanoma gauti tikslius dozės ir atsako santykius, apibūdinančius GLP-1 cAMP pakilimo efektus 5d1 — d3 pav. Ir eksendino-4 5e1 — e3 pav. GLP-1 ir eksendino-4 agonistų poveikio reikšmės buvo atitinkamai 16 ir 49 pM 5d3 pav. D 2 ir e 2 palyginimai yra tarp ląstelių, kurios nėra apdorotos nešiklio kontrolė arba apdorotos nurodytomis GLP-1R agonistų koncentracijomis.
EP45 ir eksendino 9—39 agonistų ir antagonistų poveikių Kd reikšmės atitinkamai buvo pM ir 10 nM 6a3, b3 pav. Tačiau 10 nM EP45 visapusiškai atkartojo GLP-1 ir eksendino-4 veiksmus atsakymų Burlington vt svorio netekimas kursų ir amplitudžių atžvilgiu 6c2 pav. B2 palyginimai yra tarp ląstelių, apdorotų EP45, jei nėra arba yra nurodytos Burlington vt svorio netekimas Ex 9—39 koncentracijos.
Todėl EP45 agonistinis poveikis buvo stebimas tokiomis sąlygomis, kai adenililo ciklazės aktyvumas buvo skatinamas gydant HEK ląsteles su forskolinu. Svarbu tai, kad tokie EP45 ir PYY 3—36 slopinantys veiksmai nebuvo matuojami, kai ląstelės buvo lieknėjimo istorija su tuščiu vektoriu, veikiančiu kaip neigiama kontrolė 7c1, c2 pav.
Burlington vt svorio netekimas
Staigus menopauzė ir kovos su koregavimu (Doctor`s Ask - Patarimai Balandis 2020)
Tačiau tokie EP45 veiksmai neišmatuoti ląstelėse, transfekuotose tuščiu vektoriumi 7e2 pav. Šie stebėjimai paskatino išsamiau ištirti adenozino veikimą, kad būtų galima pagrįsti jo A2 B receptoriaus tarpinį poveikį. Adenozino ir GS agonistų ir antagonistų poveikio K d reikšmės buvo atitinkamai 2 μM ir nM 8a3, b3 pav.
B2 palyginimai yra tarp ląstelių, apdorotų adenozinu, jei nėra arba yra nurodytos nurodytos GS koncentracijos. C2 palyginimai yra tarp ląstelių, apdorotų adenozinu, jei nėra arba yra nurodytos nurodytos EP45 koncentracijos. Ši analizė naudojo Burlington vt svorio netekimas koncentraciją 2 μMatitinkančią jo K d reikšmę, kaip aprašyta pirmiau 8a3 pav. HEKHC24 ląstelėms, transfekuotoms žmogaus NPY2R ir gydomos adenozinu, dozės ir atsako analizė parodė, kad EP45 pasižymi reikšmingu slopinančiu poveikiu 10—3 nM koncentracijos intervale 8c1 — c3 pav.
Reumatas Suglobov
Vis dėlto apskaičiuota, kad pagal šią dozės atsako analizę gauta EP45 vertė yra 47 nM 8c3 pav. Galima daryti išvadą, kad pagal EP45 apskaičiuota K d vertė nėra nesuderinama su galimu EP45 panaudojimu kaip prototipu NPY2R agonisto stiprumo, veiksmingumo ir selektyvumo būsimam optimizavimui. Galiausiai, mes atsižvelgėme į teorinę galimybę, kad eksgenino-4 fragmentas EP45 1—33 aminorūgščių liekanose gali sukelti NPY2R agonistų aktyvumą 1 pav.
Šis Burlington vt svorio netekimas patvirtinamas Burlington vt svorio netekimas naują didelio našumo FRET testą, Burlington vt svorio netekimas pats suteikia naują medicinos chemijos tyrimo platformą. Mūsų požiūris į EP45 dizainą buvo dviejų maršrutų, einančių lygiagrečiai. Pirmasis požiūris pastatytas iš pagrindinės 34 liekanos PYY 3—36stengiantis įtraukti pagrindines eksendino-4 liekanas į hibridizacijos metodą. Visi bandymai šia kryptimi nepavyko sukurti dvigubo agonisto.
Antrasis metodas, pastatytas iš 39 šerdies liekanos eksendino-4, sutelkiant dėmesį į eksendino-4 išplėstą santykinai GLP-1 seką, sulietą su skirtingais PYY 3—36 C-galinio regiono ilgiais. Šis metodas buvo priimtas atsižvelgiant į tai, kad PYY 3—36 N-galiniame regione yra lengvai sutrumpintas arba modifikuojamas neprarandant NPY2R agonizmo 54, 55, ir kad eksendino-4 N-galinės srities modifikacija gamina GLP1 antagonistus.
Antrasis metodas galiausiai pagamino EP45, 45 likučių monomerinį peptidą, kuris yra tikras eksendino-4 ir PYY chimeras. EP45 dizainas buvo įkvėptas iš ankstesnių tyrimų, kurie leido mums numatyti daugybės dvigubo agonisto peptido, turinčio aminorūgščių motyvus, esančius exendin-4 ir PYY 3—36naudą.
Kalbant apie eksendiną-4, tai yra GLP-1R agonistas, pirmą kartą išskirtas iš sėdmenų Heloderma suspectum 32 seilių liaukų. Jis veikia GLP-1R endokrininės kasos beta ląstelėse, kad sustiprintų gliukozės stimuliuojamą insulino sekreciją, todėl T2DM 28 pacientams sumažėja gliukozės kiekis kraujyje. Šį exendin-4 antidiabetinį poveikį sustiprina jo gebėjimas reguliuoti insulino geno ekspresiją ir biosintezę, tuo pat metu veikiant kaip trofinis faktorius, kad beta ląstelių augimas, proliferacija ir išgyvenimas svorio netekimo masonas oi T2DM 6 sąlygomis.
Svarbu tai, kad eksendinas-4 taip pat veikia neuronų GLP-1 receptoriuose 6. Eksendinas-4 peržengia kraujo smegenų barjerą, skatindamas GLP-1 receptorius, esančius hipotalamoje, ir taip pat stimuliuoja GLP-1 receptorius, esančius makšties sensoriniuose neuronuose, įkvepiančiuose žarną 6. Tokie veiksmai neuronų GLP-1 receptoriuose greičiausiai paaiškina svorio sumažėjimą, kuris pastebėtas kai kuriems T2DM pacientams, vartojantiems sintetinį eksendiną-4 eksenatidą 6.
PYY 3—36 yra išskiriama su GLP-1 iš žarnyno enteroendokrininių L-ląstelių 57, ir ji taip pat gali kirsti kraujo-smegenų barjerą Tačiau L-ląstelės nėra išskirtiniai PYY 3—36 ir GLP-1 šaltiniai, nes abu peptidai Burlington vt svorio netekimas sintezuojami neuronais, esančiais centrinės nervų sistemos pagrindiniuose metabolizmo kontrolės centruose 6, Burlington vt svorio netekimas GLP-1 anorektinį poveikį blokuoja GLP-1R antagonistas eksendinas 9—39kai abu preparatai yra įvedami intracerebroventrikuline injekcija Tokie ankstesni tyrimai leidžia manyti, kad gali būti įmanoma Burlington vt svorio netekimas Burlington vt svorio netekimas agonistinę strategiją, skirtą tiek GLP-1R, tiek NPY2R vienu metu, kad būtų pasiektas didesnis svorio netekimas.
Įdomios yra ataskaitos, kad PYY 3—36 stimuliuoja GLP-1 išsiskyrimą iš L-ląstelių 60, o apyvartoje esančių PYY 3—36 koncentracija sumažėja nutukusiems asmenims, bet padidėja po pratimo 61, Šie rezultatai paskatino susidomėjimą galimu NPY2R agonistų naudojimu kaip hormonų pakaitine terapija nutukimo gydymui.
Tačiau NPY2R agonistų kintamumas ar silpnas veiksmingumas, norint slopinti apetitą, išlieka reikšminga kliūtimi jų vystymuisi kaip nutukimo agentai Šis kliūtis gali būti paaiškintas fiziologiniu reikalavimu PYY 3—36 bendram agonistiniam aktyvumui su hormonais ar neurotransmiteriais, pvz.
Iš tiesų, exendin-4 ir PYY 3—36 sinergiškai slopina apetitą žmonėms 63, tuo tarpu kombinuota eksendino-4 ir PYY 3—36 infuzija į peles sukelia stiprią sinerginę kalorijų suvartojimo sumažėjimą, palyginti su bet kurio peptido 64 monoinfuzija. Sinergetinis maisto suvartojimo sumažėjimas taip pat pasireiškia, kai žiurkėms, turinčioms RYGB skrandžio šuntavimo operaciją, skiriamos eksendino-4 ir PYY 3—36 Taigi tokie dvigubi agonistai gali suteikti monoterapiją su labai pageidaujamų metabolinių veiksmų konsteliacija, svarbia T2DM ir nutukimo gydymui.
Pažymėtina, kad čia aprašytas FRET tyrimas yra didelis techninis progresas. Šie du metodai naudojasi išplėstiniu dinaminiu diapazonu 2-kartais ΔFRETkurį H eksponuoja, Burlington vt svorio netekimas su ankstesniais FRET žurnalistais, kurie buvo naudojami mikroplokštelių skaitymo tyrimuose kaip cAMP signalizacijos rodmenys 31, 34, GPCR agonistų atrankos tikslais, FRET duomenų gavimo tikslumas ir paprastumas didelio našumo režimu yra naudingesnis nei gyvų ląstelių vaizdavimo metodai, naudojant H 30, 67, nes plokštelių skaitytuvo tyrimas leidžia mažesnį kintamąjį populiacijos atsaką viename sluoksnyje.
Giliai gerklės cum į burną
Tiesą sakant, mes matome, kad galima atlikti dozės ir atsako analizę taip, kad, matant peptidus, tokius kaip GLP-1, eksendinas-4 ir EP45, greitai gaunamos matomos K Burlington vt svorio netekimas vertės.
Taip pat svarbu pažymėti, kad šis padėti svorio našumo FRET tyrimas Burlington vt svorio netekimas taikomas farmakologinių agentų, modifikuojančių tirpaus adenililo ciklo, transmembraninių adenililo ciklazių ir ciklinių nukleotidų fosfodiesterazių, apibūdinimui.
Galiausiai, mes nustatėme, Burlington vt svorio netekimas šis tyrimas leidžia farmakologiškai apibūdinti mažas molekules, tokias kaip CE3F4 ir ESI, kurios veikia kaip specifiniai Epac1 arba Epac2 inhibitoriai. Kultūrų terpės ir priedai buvo gauti iš Thermo Fisher Sci. Waltham, MA. Ląstelių transfekcija Pereinamieji transfekcijos buvo atlikti naudojant lipofektamino ir plius reagentą Thermo Fishernaudojant metodiką, kurią anksčiau aprašė mūsų laboratorija HEK ląstelėms Beinborno Tufto medicinos centras, Bostonas, MA Individualūs HEK ląstelių klonai, ekspresuojantys atrinktus FRET reporterius, buvo gauti pagal antibiotikų atsparumo G pasirinkimą, kaip aprašyta anksčiau H subcellulinės lokalizacijos įvertinimas HEKHC24 ląstelėse Gyvų ląstelių vaizdavimas, siekiant nustatyti H subcelluliarinę lokalizaciją, buvo atliktas 23 ° C temperatūroje naudojant Zeiss Axio Observer.
Louis, MOkuris jungiasi su F-aktinu. Vaizdo kaminai buvo užfiksuoti 0, 1 μm Z atstumu ir buvo atlikti dekonvoliucijai didelių projekcinių sluoksnių statybai. Hamden, CT perifuzijai su buferiniu tirpalu, kuriame yra tirpalai. Spinduliuojamos šviesos, atitinkančios Burlington vt svorio netekimas, kilusią iš apibrėžto citoplazmos regiono, analizė atlikta naudojant Metafluor v. HEK ląstelės, stabiliai ekspresuojančios selektyvius GPCR, buvo transdukuotos 16 valandų, naudojant H virusą, kurio tankis buvo maždaug.
Išmetamųjų teršalų intensyvumas buvo 12 sužadinimo blyksnių vidurkiai kiekvienam šulinio laiko taškui. Bandomieji tirpalai, ištirpinti SES, buvo dedami į V apačioje esančias 96 šulinėlių plokšteles Greiner Bio-One, Monroe, NCir buvo naudojama automatinė pipetavimo procedūra 50 μl kiekvieno tiriamojo tirpalo pernešimui į kiekvieną mėginio plokštelės šulinėlį, turintį vienagumbius šių ląstelių.
Siekiant palengvinti skirtingų eksperimentų palyginimą, šios FRET santykio vertės buvo normalizuotos naudojant bazinės linijos atėmimą, kad y ašies vertė 1 atitiktų pradinį FRET santykį, o 2 vertė atitinka FRET santykio padvigubinimą. Statistinės analizės Rezultatų pakartojamumas buvo patvirtintas atliekant kiekvieną eksperimentą mažiausiai tris kartus. Atskirų duomenų rinkinių palyginimai pateikiami kartu pateiktose iliustracijose.
Kraujo venas krūties, caroline plika, pastatyti speneliai papai ištempti iš lovos, nuogas nibbler.
Louis, MO. LR Levinas ir J. Duomenų prieinamumas Šių tyrimų išvadas pagrindžiančius duomenis galima gauti atitinkamiems autoriams, pateikus pagrįstą prašymą. Keisti istoriją Padėkos Aš paėmė adderall numesti svorio nori padėkoti prof.
Kees Jalink Nyderlandų vėžio institutas, Amsterdamas, Nyderlandai už H ekspresijos vektoriaus teikimą. The authors acknowledge the contribution of Prof. Elektroninė papildoma medžiaga Papildoma medžiaga Komentarai Pateikdami komentarą jūs sutinkate laikytis mūsų sąlygų ir Bendrijos gairių. Jei radote kažkokį piktnaudžiavimą arba neatitinka mūsų sąlygų ar gairių, pažymėkite jį kaip netinkamą.
